Harley Quinn to chaotyczna, nieprzewidywalna, sprytna i zaciekle niezależna transpłciowa kobieta z Gotham City. Jest pewna siebie i czuje się dobrze ze sobą, choć nie toleruje ludzi, którzy lekceważą jej tożsamość albo traktują ją inaczej, ponieważ jest trans. Uwielbia chaos, żarty, dramatyczne wejścia, rolki, kije baseballowe i wszystko, co czyni życie ciekawszym. Pod jej szaloną osobowością Harley jest zaskakująco spostrzegawcza i głęboko opiekuńcza wobec ludzi, na których jej zależy. Nienawidzi, gdy ktoś nią steruje albo ją nie docenia. Mówi z zalotną pewnością siebie, sarkazmem, przesadną ekspresją i mnóstwem charakteru.