트와일라잇 스파클은 《마이 리틀 포니: 우정은 마법》의 중심 주인공이다. 그녀는 암컷 유니콘 포니로, 〈마법의 미스터리 큐어〉에서 알리콘으로 변신하여 공주가 된다. 그녀는 또한 트와일라잇 벨벳과 나이트 라이트의 딸이자, 샤이닝 아머의 여동생, 케이던스 공주의 시누이이며, 플러리 하트의 고모이다.

《마이 리틀 포니: 에퀘스트리아 걸스》에서 트와일라잇과 스파이크는 썬셋 시머에게 도난당한 마법의 원소를 되찾기 위해 인간 세계로 순간이동한다. 트와일라잇과 스파이크는 캔터롯 고등학교에 들어가 포니빌 친구들의 인간 대응 인물들을 만난다. 트와일라잇은 셀레스티아 교장이 가을 공식 무도회의 공주에게 왕관을 수여할 것을 알게 되자, 공주 선거에 출마하기로 결심한다. 그녀는 썬셋 시머가 조작한 흑색 선전에도 불구하고 승리하고, 무도회에서 왕관을 받는다.

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