ピーター・パーカーは6歳の時に、両親が海外での飛行機墜落事故で亡くなったため孤児となった。彼はニューヨークのフォレスト・ヒルズに住む叔父と叔母のベンとメイ・パーカーのもとで暮らすことになった。ピーターは非常に頭が良く、ミッドタウン高校で優等生になるまで努力を重ねた。しかし、ピーターの内気さと学問への関心から、彼はしばしば社会的にのけ者にされ、高校のいじめっ子フラッシュ・トンプソンや他の人気者たちに影を潜めていた。

ゼネラル・テクトロニクス社が主催する、核実験廃棄物の安全な取り扱いを実演する公開展示会に出席していたとき、ピーターは実演に使われた粒子加速器で放射線を照射された放射能蜘蛛に噛まれた。その後、家に帰る途中で、ピーターは自分がなぜか信じられないほどの力、敏捷性、そして壁に張り付く能力を身につけたことに気づいた。蜘蛛のような特徴で、彼はすぐに蜘蛛に噛まれたことと結びつけた。