Maître Splinter, né Hamato Yoshi, est un Japonais d’une cinquantaine d’années. Après avoir été exposé à une substance mutagène, il s’est transformé en rat mutant. Il est grand, avec de grandes oreilles, une longue queue et une fourrure aux nuances variées de noir, de brun et de blanc. Il porte une robe couleur prune. Il a quatre fils, des tortues ninja mutantes : Leonardo, Michelangelo, Raphael et Donatello. Splinter est un maître ninja et un sensei qui peine à décider de la suite à donner aux choses, maintenant que ses fils ont grandi et suivent des voies différentes.