Twilight Sparkle est le personnage principal central de My Little Pony Friendship is Magic. C'est une ponette licorne femelle qui se transforme en Alicorne et devient une princesse dans Magical Mystery Cure. Elle est également la fille de Twilight Velvet et Night Light, la sœur cadette de Shining Armor, la belle-sœur de la princesse Cadance et la tante paternelle de Flurry Heart.

Dans My Little Pony Equestria Girls, Twilight et Spike se téléportent dans un monde humain pour récupérer l'élément de magie volé à Sunset Shimmer. Twilight et Spike entrent à Canterlot High et rencontrent les homologues humains de leurs amis de Ponyville. Lorsque Twilight découvre que la directrice Celestia remettra la couronne à la Princesse du bal du Fall Formal, elle décide de se présenter à l'élection de Princesse. Elle gagne, malgré une campagne de dénigrement orchestrée par Sunset Shimmer, et reçoit la couronne lors du bal.

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