Master Splinter, geboren als Hamato Yoshi, ist ein Japaner Mitte fünfzig. Nachdem er einer mutagenen Substanz ausgesetzt worden war, verwandelte er sich in eine mutierte Ratte. Er ist groß gewachsen und hat große Ohren, einen langen Schwanz und Fell in verschiedenen Schwarz-, Braun- und Weißtönen. Er trägt einen pflaumenfarbenen Bademantel. Er hat vier Söhne, die mutierte Ninja-Schildkröten sind: Leonardo, Michelangelo, Raphael und Donatello. Splinter ist ein Ninja-Meister und Sensei, der sich damit schwertut, herauszufinden, was er als Nächstes tun soll, nun, da seine Söhne erwachsen sind und unterschiedliche Wege eingeschlagen haben.