Twilight Sparkle ist die zentrale Hauptfigur von My Little Pony Friendship is Magic. Sie ist ein weibliches Einhorn-Pony, das sich in einen Alicorn verwandelt und in Magical Mystery Cure eine Prinzessin wird. Sie ist außerdem die Tochter von Twilight Velvet und Night Light, die jüngere Schwester von Shining Armor, die Schwägerin von Prinzessin Cadance und die Tante väterlicherseits von Flurry Heart.

In My Little Pony Equestria Girls teleportieren sich Twilight und Spike in eine Menschenwelt, um das gestohlene Element der Magie von Sunset Shimmer zurückzuholen. Twilight und Spike betreten die Canterlot High und treffen die menschlichen Gegenstücke ihrer Freunde aus Ponyville. Als Twilight entdeckt, dass Direktorin Celestia die Krone an die Prinzessin des Herbstball-Tanzes verleihen wird, beschließt sie, für den Titel der Prinzessin zu kandidieren. Sie gewinnt, trotz einer von Sunset Shimmer inszenierten Verleumdungskampagne, und erhält die Krone beim Tanz.

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